提高细胞转导效率，Fibronectin有一套！

  纤维连接蛋白(fibronectin，FN)是一个定位于细胞外基质(extracellularmatrices，ECM)的广泛分布的多结构域的大分子量的糖蛋白。它的分子量大约230KD-250KD，除了在胞外基质中，在血清中的含量也很丰富。FN的结构较为特殊，由三种模块排列组合而成，分别是Ⅰ型模块，Ⅰ型模块和Ⅱ型模块。在Ⅰ型模块和Ⅱ型模块之间有两个分子内的二硫键可以稳定折叠的分子结构。Ⅱ型模块没有二硫键连接，是由7个串联的β折叠的结构形成^[1-2]。两个FN分子通过C末端的一对反向二硫键可以形成一个 500KD的二聚体。通过可变剪切可以产生多种亚型的FN分子^[3]。

    文章研究了如何通过特定纤维连接蛋白片段与逆转录病毒和目标细胞的共定位来增加哺乳动物细胞的基因转导。研究证明，纤维连接蛋白片段中的特定序列可以直接与逆转录病毒颗粒结合，从而增强基因转导效率。当细胞附着在含有这些逆转录病毒结合序列的嵌合片段上时，包括小鼠长期再生造血细胞在内的哺乳动物细胞的转导效率大大提高。此外，通过在纤维连接蛋白肽上共定位逆转录病毒和目标细胞，可以利用独特的配体/受体相互作用实现对特定细胞类型的定向转导^[4]。

    研究人员发现，在使用人类外周血单个核细胞（PBMCs）进行扩增时，通过同时刺激重组人纤维连接蛋白片段（CH-296）和抗CD3单克隆抗体，可以高效地扩增细胞并保持其天然表型。在这篇文章中，研究人员探索了使用这种共同刺激方法来生成经过基因改造的T细胞的可能性。他们发现，与抗CD28刺激相比，与CH-296共同刺激可以获得更高的基因转导效率。结果显示，与抗CD3/CD28刺激方法相比，抗CD3/CH-296刺激可以获得超过10倍的细胞扩增和更高的基因转导效率，并且保持了天然表型。因此，使用抗CD3/CH-296共同刺激的慢病毒转导是一种有效的方法^[5]。

在CAR-T细胞治疗等细胞疗法中，大规模的T细胞扩增和高效的基因转导是关键步骤。各类文献表明，Fibronectin可以在基因与细胞疗法中发挥重要作用，特别是可明显提高病毒的转导效率以及T细胞扩增率

参考文献：

[1] Potts JR, Campbell ID. Fibronectin structure and assembly. Current opinion in cell biology.1994;6(5):648-55.

[2] Leahy DJ, Aukhil l, Erickson HP. 2.0 A crystal structure of a four-domain segment of humanfibronectin encompassing the RGD loop and synergy region. Cell. 1996;84(1):155-64.

[3] Mao Y, Schwarzbauer JE. Fibronectin fibrillogenesis, a cell-mediated matrix assembly process.Matrix biology : journal of the International Society for Matrix Biology. 2005;24(6):389-99.

[4] Hanenberg, H et al. Colocalization of retrovirus and target cells on specific fibronectin fragments increases genetic transduction of mammalian cells. Nature medicine. 1996;2(8): 876-82.

[5] Chono, Hideto et al. Optimization of lentiviral vector transduction into peripheral blood mononuclear cells in combination with the fibronectin fragment CH-296 stimulation. Journal

biochemistry. 2011;149(3): 285-92. 

“ 东抗生物可提供高品质重组Fibronectin蛋白”