EA0202 LAMP Fluorescent Master Mix（Liquid）

产品简介

LAMP 是一种新型核酸扩增技术。采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物, 依赖与Bst DNA聚合酶的强链置换活性，在30-60分钟内DNA扩增可达10⁹-10¹⁰倍。

2 × LAMP Master Mix with Dye 用于模板DNA的检测，提供快速一步法的解决方案。该预混液采用Bst DNA聚合酶的优化配方，可快速地进行环介导等温扩增（LAMP）反应。该预混液包含酶Mix、dNTP、荧光染料和反应Buffer在内的所有必需组分，只需加入用于等温扩增的引物和模板，进行实时荧光检测。即可在30-50min内得到扩增结果。

产品规格

保存条件

干冰运输，请注意避免反复冻融。-20 ℃储存，长期储存放置-80 ℃，有效期1年。

实验流程

1. 本产品在-20 ℃取出后会有轻微沉淀物，需室温解冻混匀至沉淀消失，离心后使用。

2. 按以下组分配置反应混合液

*引物终浓度推荐：1.6 μM FIP/BIP，0.4 μM LF/LB，0.2 μMF3/B3。轻轻混匀并离心。

3. 置于荧光定量仪65 ℃反应，每分钟收集一次荧光信号，设置35-45 cycles。

4. 热失活条件：85 ℃反应5-10 min。

（在LAMP反应结束后一般禁止将反应管盖打开，如后续进行电泳等开盖操作，务必进行热失活操作，以防气溶胶污染）。

注意事项

1. 建议每次实验增加无模板阴性对照。

2. 建议试剂配制和模板加入的操作在不同区域进行，以免造成环

3. 境的污染，影响后续实验的进行。

4. 为了保证重复良好的结果，建议模板DNA最后加入。

5. 建议质粒DNA加入量在1fg-10 ng内，基因组DNA加入量在1pg-100 ng内。

6. 若阴性检出率过高，可适当进行反应温度调整，本产品可在63 ℃-72 ℃温度区间进行调整。

7. 推荐使用Primer在线设计软件 http://primerexplorer.jp/e/

应用实例

LAMP扩增N基因质粒