EA0203 Rapid Extraction and Lamp-Test Kit for ASFV 1.0

产品简介

非洲猪瘟（African Swine Fever，ASF）是一种由病毒引起的传染性疾病，可影响所有年龄的猪，引起出血热。非洲猪瘟有多种表现形式，从特急性、急性、亚急性到慢性和无明显症状。最常见的是急性发病形式，相关致死率高达100%。非洲猪瘟严重威胁养猪业的健康生产。不仅威胁到食品安全，对供应链中养殖者和其他环节的参与者产生重大威胁，而且因非洲猪瘟引发的贸易限制对国际贸易也会产生重大影响。

LAMP（环介导等温技术）是一种新型核酸扩增技术。采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物，依赖与Bst DNA聚合酶的强链置换活性，在30-60 min内将DNA扩增可达10⁹-10¹⁰倍。

本试剂盒配备了核酸快速释放液、精心优化的扩增反应预混液和非洲猪瘟（ASFV，p72 (B646L)）假病毒作为阳性质控品，并提供精心设计验证的特异LAMP引物mix，一站式配齐，具有恒温（67 ℃）、快速（20 min裂解+30 min检测）、灵敏度高和特异性强等优点，操作简便。

产品规格

名称	规格（100 T）
2 × LAMP Master Mix with Dye	1.25 mL
10 × ASFV Primer Mix*	250 μL
核酸快速释放液（DNA型）	1 mL
ASFV假病毒（10⁵copies/μL）	50 μL

保存条件

干冰运输，请注意避免反复冻融。

核酸快速释放液（DNA型），4℃保存。

其他组分请放置-20℃保存。试剂盒保质期6个月。

检测步骤

一、样本裂解过程

1. 按以下组分进行样本裂解：

*血液对后续的实验验证（如等温扩增、qPCR等）有抑制作用，可按照

推荐的比例进行裂解结束后，再加入裂解体积的3-5倍的水进行稀释后再检测。

** 推荐裂解比例，可以适当增加核酸裂解液的量，以便更有效的裂解。

2. 摇晃混匀，室温放置15-2 0min。

3. 样本处理后，取2 μL裂解产物作为模板，直接用于扩增反应(对于杂质多、抑制剂多的样本，可离心后取上清或稀释数倍后检测)。

二、等温扩增检测

1. 本试剂盒2 × LAMP Master Mix with Dye放置低温有轻微的沉淀物，属于正常现象。试剂盒中组分提前取出置于室温解冻后，混匀至沉淀消失，离心后使用。

2. 按以下组分配置反应混合液：

组分	单次反应体积	终浓度
2 × LAMP Master Mix with Dye	12.5 μL	1 ×
10 × Primer Mix*	2.5 μL	1 ×
裂解后核酸*	1-2 μL	/
水	补充至25 μL	/